1. Scop: Această procedură își propune să ofere o procedură standardizată pentru operațiile aseptice și protejarea încăperilor sterile.
2. Domeniu de aplicare: laborator de testare biologică
3. Persoană responsabilă: Supervizor QC Tester
4. Definiție: Niciuna
5. Măsuri de siguranță
Efectuați operațiuni aseptice cu strictețe pentru a preveni contaminarea microbiană; operatorii trebuie să oprească lampa UV înainte de a intra în camera sterilă.
6. Proceduri
6.1. Camera sterilă trebuie să fie dotată cu o sală de operație sterilă și o cameră tampon. Curățenia sălii de operație sterile trebuie să atingă clasa 10000. Temperatura interioară trebuie menținută la 20-24°C, iar umiditatea trebuie menținută la 45-60%. Curățenia mesei sterile trebuie să atingă clasa 100.
6.2. Camera sterilă trebuie menținută curată și este strict interzisă acumularea de resturi pentru a preveni contaminarea.
6.3. Preveniți cu strictețe contaminarea tuturor echipamentelor de sterilizare și a mediilor de cultură. Cei contaminați trebuie să înceteze utilizarea lor.
6.4. Camera sterilă trebuie să fie dotată cu dezinfectanți cu concentrație funcțională, cum ar fi soluție de crezol 5%, alcool 70%, soluție de clormetionină 0,1% etc.
6.5. Camera sterilă trebuie sterilizată și curățată periodic cu un dezinfectant adecvat pentru a se asigura că nivelul de curățenie al camerei sterile îndeplinește cerințele.
6.6. Toate instrumentele, vasele și alte obiecte care trebuie aduse în camera sterilă trebuie ambalate strâns și sterilizate prin metode adecvate.
6.7. Înainte de a intra în camera sterilă, personalul trebuie să se spele pe mâini cu săpun sau dezinfectant, apoi să se schimbe în haine de lucru speciale, încălțăminte, căști, măști și mănuși în camera tampon (sau să se șteargă din nou pe mâini cu etanol 70%) înainte de a intra în camera sterilă. Operațiunile trebuie efectuate în camera bacteriene.
6.8. Înainte de utilizarea camerei sterile, lampa ultravioletă din camera sterilă trebuie pornită pentru iradiere și sterilizare timp de mai mult de 30 de minute, iar masa de curățare trebuie pornită simultan pentru suflare cu aer. După finalizarea operațiunii, camera sterilă trebuie curățată la timp și apoi sterilizată cu lumină ultravioletă timp de 20 de minute.
6.9. Înainte de inspecție, ambalajul exterior al probei de testare trebuie păstrat intact și nu trebuie deschis pentru a preveni contaminarea. Înainte de inspecție, utilizați dischete de bumbac cu 70% alcool pentru a dezinfecta suprafața exterioară.
6.10. În timpul fiecărei operațiuni, trebuie efectuat un control negativ pentru a verifica fiabilitatea funcționării aseptice.
6.11. Când absorbiți lichid bacterian, trebuie să folosiți o bilă de aspirație pentru a-l absorbi. Nu atingeți paiul direct cu gura.
6.12. Acul de inoculare trebuie sterilizat cu flacără înainte și după fiecare utilizare. După răcire, cultura poate fi inoculată.
6.13. Paiele, eprubetele, vasele Petri și alte ustensile care conțin lichid bacterian trebuie înmuiate într-o găleată de sterilizare cu soluție Lysol 5% pentru dezinfectare și scoase și clătite după 24 de ore.
6.14. Dacă se varsă lichid bacterian pe masă sau pe podea, trebuie să turnați imediat o soluție de acid carbolic 5% sau Lysol 3% pe zona contaminată timp de cel puțin 30 de minute înainte de tratare. Când hainele de lucru și căștile sunt contaminate cu lichid bacterian, acestea trebuie scoase imediat și spălate după sterilizarea cu abur de înaltă presiune.
6.15. Toate obiectele care conțin bacterii vii trebuie dezinfectate înainte de a fi clătite sub robinet. Este strict interzisă poluarea canalizării.
6.16. Numărul de colonii din camera sterilă trebuie verificat lunar. Cu masa curată deschisă, se iau câteva plăci Petri sterile cu un diametru interior de 90 mm și se injectează aseptic aproximativ 15 ml de mediu de cultură cu agar nutritiv, topit și răcit la aproximativ 45°C. După solidificare, se așează plăcile cu susul în jos la 30-35°C. Se incubează timp de 48 de ore într-un incubator la 30-35°C. După verificarea sterilității, se iau 3 până la 5 plăci și se așează în stânga, mijloc și dreapta poziției de lucru. După deschiderea capacului și expunerea lor timp de 30 de minute, se așează cu susul în jos într-un incubator la 30-35°C timp de 48 de ore și se scot. Se examinează. Numărul mediu de bacterii diverse de pe placă într-o zonă curată de clasa 100 nu trebuie să depășească 1 colonie, iar numărul mediu într-o cameră curată de clasa 10000 nu trebuie să depășească 3 colonii. Dacă limita este depășită, camera sterilă trebuie dezinfectată temeinic până când inspecțiile repetate îndeplinesc cerințele.
7. Consultați capitolul (Metoda de inspecție a sterilității) din „Metode de inspecție igienică a medicamentelor” și „Practici operaționale standard din China pentru inspecția medicamentelor”.
8. Departamentul de Distribuție: Departamentul de Management al Calității
Îndrumări tehnice pentru camera curată:
După obținerea unui mediu steril și a materialelor sterile, trebuie să menținem o stare sterilă pentru a studia un microorganism specific cunoscut sau pentru a utiliza funcțiile acestuia. În caz contrar, diverse microorganisme din exterior se pot amesteca cu ușurință. Fenomenul de amestecare a microorganismelor irelevante din exterior se numește bacterii contaminante în microbiologie. Prevenirea contaminării este o tehnică critică în munca microbiologică. Sterilizarea completă, pe de o parte, și prevenirea contaminării, pe de altă parte, sunt două aspecte ale tehnicii aseptice. În plus, trebuie să împiedicăm microorganismele studiate, în special microorganismele patogene sau microorganismele modificate genetic care nu există în natură, să scape din recipientele noastre experimentale în mediul extern. În aceste scopuri, în microbiologie, există numeroase măsuri.
Camera sterilă este de obicei o cameră mică, special amenajată în laboratorul de microbiologie. Poate fi construită din tablă și sticlă. Zona nu trebuie să fie prea mare, de aproximativ 4-5 metri pătrați, iar înălțimea trebuie să fie de aproximativ 2,5 metri. În afara camerei sterile trebuie amenajată o cameră tampon. Ușa camerei tampon și ușa camerei sterile nu trebuie să fie orientate în aceeași direcție pentru a împiedica fluxul de aer să aducă diverse bacterii. Atât camera sterilă, cât și camera tampon trebuie să fie etanșe. Echipamentul de ventilație interioară trebuie să aibă dispozitive de filtrare a aerului. Podeaua și pereții camerei sterile trebuie să fie netezi, dificil de adunat murdărie și ușor de curățat. Suprafața de lucru trebuie să fie plană. Atât camera sterilă, cât și camera tampon sunt echipate cu lumini ultraviolete. Luminile ultraviolete din camera sterilă se află la 1 metru distanță de suprafața de lucru. Personalul care intră în camera sterilă trebuie să poarte haine și căști sterilizate.
În prezent, camerele sterile există mai ales în fabricile de microbiologie, în timp ce laboratoarele generale folosesc bănci sterile. Funcția principală a băncii sterile este de a utiliza un dispozitiv cu flux laminar de aer pentru a îndepărta diverse prafuri minuscule, inclusiv microorganisme, de pe suprafața de lucru. Dispozitivul electric permite aerului să treacă prin filtrul HEPA și apoi să intre pe suprafața de lucru, astfel încât suprafața de lucru este întotdeauna menținută sub controlul fluxului de aer steril. În plus, există o perdea de aer de mare viteză pe partea laterală, aproape de exterior, pentru a preveni pătrunderea aerului bacterian extern.
În locuri cu condiții dificile, se pot folosi și cutii sterile din lemn în loc de bancuri sterile. Cutia sterilă are o structură simplă și este ușor de mutat. Există două orificii pe partea din față a cutiei, care sunt blocate de uși cu acționare prin împingere/tragere atunci când nu este în funcțiune. Puteți să vă extindeți brațele în timpul funcționării. Partea superioară a părții frontale este echipată cu sticlă pentru a facilita funcționarea internă. În interiorul cutiei există o lampă ultravioletă, iar ustensilele și bacteriile pot fi introduse printr-o ușiță mică din lateral.
Tehnicile operaționale aseptice nu numai că joacă în prezent un rol esențial în cercetarea și aplicațiile microbiologice, dar sunt utilizate pe scară largă și în multe biotehnologii. De exemplu, tehnologia transgenică, tehnologia anticorpilor monoclonali etc.
Data publicării: 06 martie 2024