1. Scop: Această procedură urmărește să ofere o procedură standardizată pentru operațiile aseptice și protecția încăperilor sterile.
2. Domeniul de aplicare: laborator de teste biologice
3. Persoană responsabilă: QC Supervisor Tester
4.Definiție: Niciuna
5. Măsuri de siguranță
Efectuați strict operațiuni aseptice pentru a preveni contaminarea microbiană;operatorii ar trebui să stingă lampa UV înainte de a intra în camera sterilă.
6.Proceduri
6.1.Camera sterilă trebuie să fie echipată cu o sală de operație sterilă și o cameră tampon.Curățenia camerei de operații sterile ar trebui să atingă clasa 10000. Temperatura interioară trebuie menținută la 20-24°C, iar umiditatea să fie menținută la 45-60%.Curățenia băncii curate ar trebui să ajungă la clasa 100.
6.2.Camera sterilă trebuie păstrată curată și este strict interzisă adunarea resturilor pentru a preveni contaminarea.
6.3.Preveniți cu strictețe contaminarea tuturor echipamentelor de sterilizare și a mediilor de cultură.Cei care sunt contaminați ar trebui să înceteze să le mai folosească.
6.4.Camera sterilă trebuie să fie echipată cu dezinfectanți cu concentrație de lucru, cum ar fi soluție de crezol 5%, alcool 70%, soluție de clormetionină 0,1% etc.
6.5.Camera sterilă trebuie sterilizată în mod regulat și curățată cu dezinfectant adecvat pentru a se asigura că curățenia camerei sterile îndeplinește cerințele.
6.6.Toate instrumentele, instrumentele, vasele și alte articole care trebuie aduse în încăpere sterilă trebuie să fie etanș înfășurate și sterilizate prin metode adecvate.
6.7.Înainte de a intra în camera sterilă, personalul trebuie să se spele pe mâini cu săpun sau dezinfectant și apoi să se schimbe în haine de lucru speciale, pantofi, pălării, măști și mănuși în camera tampon (sau să își ștergă din nou mâinile cu 70% etanol) înainte de a intra în camera sterilă.Efectuați operații în camera bacteriană.
6.8.Înainte de a utiliza camera sterilă, lampa cu ultraviolete din camera sterilă trebuie aprinsă pentru iradiere și sterilizare mai mult de 30 de minute, iar banca curată trebuie aprinsă în același timp pentru suflarea aerului.După finalizarea operației, camera sterilă trebuie curățată la timp și apoi sterilizată cu lumină ultravioletă timp de 20 de minute.
6.9.Înainte de inspecție, ambalajul exterior al probei de testat trebuie păstrat intact și nu trebuie deschis pentru a preveni contaminarea.Înainte de inspecție, utilizați bile de bumbac cu alcool 70% pentru a dezinfecta suprafața exterioară.
6.10.În timpul fiecărei operațiuni, trebuie efectuat un control negativ pentru a verifica fiabilitatea funcționării aseptice.
6.11.Când absorbiți lichidul bacterian, trebuie să utilizați o minge de aspirație pentru a-l absorbi.Nu atingeți paiele direct cu gura.
6.12.Acul de inoculare trebuie sterilizat la flacără înainte și după fiecare utilizare.După răcire, cultura poate fi inoculată.
6.13.Paiele, eprubetele, vasele Petri și alte ustensile care conțin lichid bacterian trebuie să fie înmuiate într-o găleată de sterilizare care conține 5% soluție de Lysol pentru dezinfecție și scoase și clătite după 24 de ore.
6.14.Dacă există lichid bacterian vărsat pe masă sau pe podea, trebuie să turnați imediat soluție de acid carbolic 5% sau 3% Lysol pe zona contaminată timp de cel puțin 30 de minute înainte de a o trata.Atunci când hainele de lucru și pălăriile sunt contaminate cu lichid bacterian, acestea trebuie scoase imediat și spălate după sterilizarea cu abur de înaltă presiune.
6.15.Toate articolele care conțin bacterii vii trebuie dezinfectate înainte de a fi clătite sub robinet.Este strict interzisă poluarea canalizării.
6.16.Numărul de colonii din camera sterilă trebuie verificat lunar.Cu banca curată deschisă, luați un număr de vase Petri sterile cu un diametru interior de 90 mm și injectați aseptic aproximativ 15 ml de mediu de cultură cu agar nutritiv care a fost topit și răcit la aproximativ 45°C.După solidificare, puneți-l cu capul în jos la 30 până la 35 Incubați timp de 48 de ore într-un incubator ℃.După ce ați dovedit sterilitatea, luați 3 până la 5 farfurii și așezați-le în stânga, mijlocul și dreapta poziției de lucru.După ce deschideți capacul și le expuneți timp de 30 de minute, puneți-le cu capul în jos într-un incubator de 30 până la 35°C timp de 48 de ore și scoateți-le.examina.Numărul mediu de bacterii diverse de pe placă într-o zonă curată de clasa 100 nu trebuie să depășească 1 colonie, iar numărul mediu într-o cameră curată de clasa 10000 nu trebuie să depășească 3 colonii.Dacă limita este depășită, camera sterilă trebuie dezinfectată complet până când inspecțiile repetate îndeplinesc cerințele.
7. Consultați capitolul (Metoda de inspecție a sterilității) din „Metode de inspecție igienă a medicamentelor” și „Practici operaționale standard din China pentru inspecția medicamentelor”.
8. Departamentul Distributie: Departamentul Management al Calitatii
Îndrumări tehnice pentru camera curată:
După obținerea unui mediu steril și a materialelor sterile, trebuie să menținem o stare sterilă pentru a studia un anumit microorganism cunoscut sau pentru a le folosi funcțiile.În caz contrar, diverse microorganisme din exterior se pot amesteca cu ușurință. Fenomenul de amestecare a microorganismelor irelevante din exterior se numește bacterii contaminante în microbiologie.Prevenirea contaminării este o tehnică critică în activitatea microbiologică.Sterilizarea completă, pe de o parte, și prevenirea contaminării, pe de altă parte, sunt două aspecte ale tehnicii aseptice.În plus, trebuie să prevenim ca microorganismele studiate, în special microorganismele patogene sau microorganismele modificate genetic care nu există în natură, să scape din containerele noastre experimentale în mediul extern.În aceste scopuri, în microbiologie, există multe măsuri.
Camera sterilă este de obicei o cameră mică special amenajată în laboratorul de microbiologie.Poate fi construit cu foi si sticla.Suprafața nu trebuie să fie prea mare, aproximativ 4-5 metri pătrați, iar înălțimea să fie de aproximativ 2,5 metri.O cameră tampon trebuie amenajată în afara camerei sterile.Ușa camerei tampon și ușa camerei sterile nu ar trebui să fie orientate în aceeași direcție pentru a preveni introducerea de bacterii diverse a fluxului de aer.Atât camera sterilă, cât și camera tampon trebuie să fie etanșe.Echipamentele de ventilație interioară trebuie să aibă dispozitive de filtrare a aerului.Podeaua și pereții camerei sterile trebuie să fie netede, greu de adăpostit murdăria și ușor de curățat.Suprafața de lucru trebuie să fie plană.Atât camera sterilă, cât și camera tampon sunt echipate cu lumini ultraviolete.Luminile ultraviolete din camera sterilă sunt la 1 metru de suprafața de lucru.Personalul care intră în camera sterilă trebuie să poarte îmbrăcăminte și pălării sterilizate.
În prezent, încăperile sterile există în mare parte în fabricile de microbiologie, în timp ce laboratoarele generale folosesc bancuri curate.Funcția principală a bancului curat este de a folosi un dispozitiv de flux de aer laminar pentru a îndepărta diversele prafuri mici, inclusiv microorganismele de pe suprafața de lucru.Dispozitivul electric permite aerului să treacă prin filtrul hepa și apoi să intre în suprafața de lucru, astfel încât suprafața de lucru să fie întotdeauna ținută sub controlul curgerii aerului steril.Mai mult, există o perdea de aer de mare viteză pe partea apropiată de exterior pentru a împiedica pătrunderea aerului bacterian extern.
În locurile cu condiții dificile, în locul bancii curate pot fi folosite și cutii sterile din lemn.Cutia sterila are o structura simpla si este usor de mutat.Există două găuri pe partea din față a cutiei, care sunt blocate de ușile push-pull atunci când nu sunt în funcțiune.Puteți extinde brațele în timpul operației.Partea superioară a față este echipată cu sticlă pentru a facilita funcționarea internă.Există o lampă cu ultraviolete în interiorul cutiei, iar ustensilele și bacteriile pot fi introduse prin ușa mică din lateral.
Tehnicile de operare aseptică nu joacă în prezent doar un rol esențial în cercetarea și aplicațiile microbiologice, dar sunt, de asemenea, utilizate pe scară largă în multe biotehnologii.De exemplu, tehnologia transgenică, tehnologia anticorpilor monoclonali etc.
Ora postării: Mar-06-2024